Obrazowanie fluorescencji jest potężną techniką, która pozwala nam wizualizować określone cząsteczki i struktury w komórkach i tkankach. Mikroskop cyfrowy może być doskonałym narzędziem do obrazowania fluorescencyjnego, oferującego obrazowanie o wysokiej rozdzielczości i łatwe przechwytywanie danych. Jako cyfrowy dostawca mikroskopu jestem tutaj, aby podzielić się wskazówkami, jak używać mikroskopu cyfrowego do obrazowania fluorescencyjnego.
1. Wybierz odpowiedni mikroskop cyfrowy
Po pierwsze, musisz wybrać odpowiedni mikroskop cyfrowy do obrazowania fluorescencyjnego. Nie wszystkie mikroskopy cyfrowe są tworzone równe, jeśli chodzi o fluorescencję. Będziesz potrzebował mikroskopu, który ma dobre źródło światła do wzbudzenia fluorescencji. Niektóre z naszych popularnych modeli, takie jakMikroskop techniczny z monokularnymiMikroskop monokularny z ekranem 10 -calowym, są wyposażone w funkcje, które sprawiają, że są odpowiednie do pracy fluorescencyjnej. Mają regulowaną intensywność światła i mogą być ustawione na prawą długości fali dla różnych barwników fluorescencyjnych.
2. Przygotuj próbki
Właściwe przygotowanie próbki ma kluczowe znaczenie dla udanego obrazowania fluorescencyjnego. Musisz oznaczyć swoje próbki odpowiednimi barwnikami fluorescencyjnymi. Barwniki te wiążą się z określonymi cząsteczkami lub strukturami w próbce, umożliwiając im emitowanie światła, gdy są wzbudzone przez prawą długość fali światła. Upewnij się, że uważnie postępuj zgodnie z instrukcjami koncentracji barwnika i czasu inkubacji. Znakowanie ponad - lub poniżej - może wpływać na jakość twoich zdjęć.
Po oznaczeniu próbek zamontuj je na zjeżdżalni. Użyj medium montażowego kompatybilnego z barwnikami fluorescencyjnymi. Niektóre media montażowe mogą ugasić fluorescencję, więc wybierz mądrze. Upewnij się również, że próbka jest płaska i wolna od pęcherzyków powietrza, ponieważ mogą one zniekształcać twoje obrazy.
3. Ustaw mikroskop
Teraz nadszedł czas, aby skonfigurować mikroskop cyfrowy. Zacznij od włączenia mikroskopu i pozwalania mu się rozgrzać. Jest to szczególnie ważne dla źródła światła, ponieważ musi osiągnąć stabilną intensywność.
Dostosuj skupienie mikroskopu. Możesz użyć gruboziarnistych i drobnych gałek ostrości, aby uzyskać ostrą próbkę. Jeśli używasz celu o wysokim powiększeniu, zachowaj szczególną ostrożność, ponieważ głębokość pola jest bardzo płytka.
Następnie wybierz odpowiedni zestaw filtra dla barwnika fluorescencyjnego. Różne barwniki emitują i pochłaniają światło przy różnych długościach fal, więc musisz dopasować zestaw filtra do używanego barwnika. NaszXsz - 701 mld cyfrowy aparat 3MPW zestawie różnorodne zestawy filtrów, które można łatwo zmienić.
4. Dostosuj źródło światła
Źródło światła jest kluczowym czynnikiem obrazowania fluorescencyjnego. Musisz dostosować intensywność światła, aby uzyskać najlepszy wskaźnik sygnału - do - szumu. Zbyt dużo światła może powodować fotografowanie, w którym barwnik fluorescencyjny traci zdolność do emisji światła z czasem. Z drugiej strony za mało światła spowoduje przyciemniony obraz.
Większość mikroskopów cyfrowych pozwala dostosować intensywność światła. Zacznij od niskiej intensywności i stopniowo ją zwiększ, aż uzyskasz wyraźny obraz próbki fluorescencyjnej. Jeśli przechwytujesz obrazy cyfrowe, może także skorygować czas ekspozycji w aparat. Dłuższy czas ekspozycji może uchwycić więcej światła, ale może również zwiększyć szum na twoim obrazie.
5. Przechwytuj i analizuj obrazy
Po skoncentrowaniu się próbki i dostosowaniu źródła światła nadszedł czas, aby uchwycić swoje obrazy. Użyj aparatu w mikroskopie cyfrowym, aby robić zdjęcia lub nagrywać filmy. Możesz zapisać te obrazy na komputerze w celu dalszej analizy.
Istnieje wiele programów dostępnych do analizy obrazu. Programy te mogą pomóc zmierzyć intensywność fluorescencji, zliczyć komórki lub przeanalizować rozkład cząsteczek fluorescencyjnych w próbce. Niektóre mikroskopy cyfrowe są wyposażone w własne oprogramowanie, które może być bardzo przyjazne dla użytkownika.
6. Utrzymaj mikroskop
Aby zapewnić długowieczność i wydajność mikroskopu cyfrowego, niezbędna jest regularna konserwacja. Regularnie wyczyść soczewki mikroskopu za pomocą roztworu czyszczenia obiektywu i miękkiej szmatki. Zapobiegnie to wpływie na jakość twoich zdjęć.
Sprawdź regularnie źródło światła. Wymień wszelkie żarówki lub filtry, które zaczynają się degradować. Upewnij się również, że mikroskop jest przechowywany w czystym i suchym środowisku, gdy nie jest używany.
7. Rozwiązywanie problemów
Jeśli masz problemy z obrazowaniem fluorescencyjnym, możesz sprawdzić kilka rzeczy. Jeśli twoje obrazy są zbyt przyciemnione, sprawdź intensywność źródła światła i czas ekspozycji w aparacie. Jeśli widzisz dużo fluorescencji w tle, może to wynikać z przesadnej etykietowania próbki lub zanieczyszczenia. Spróbuj dokładniej umyć próbkę lub zmniejszyć stężenie barwnika.
Jeśli masz problem z ostrością, upewnij się, że próbka jest odpowiednio zamontowana i że obiektywy obiektywne są czyste. Czasami prosta regulacja gałek ostrości może rozwiązać problem.
Dlaczego warto wybrać nasze cyfrowe mikroskopy?
Jako cyfrowy dostawca mikroskopu oferujemy mikroskopy o wysokiej jakości zaprojektowane do różnych zastosowań, w tym obrazowanie fluorescencyjne. Nasze mikroskopy są łatwe w użyciu, niezawodne i mają doskonałą obsługę klienta. Niezależnie od tego, czy jesteś badaczem w laboratorium, czy studentem w klasie, nasze cyfrowe mikroskopy mogą zaspokoić Twoje potrzeby.
Jeśli chcesz kupić mikroskop cyfrowy do obrazowania fluorescencyjnego lub masz pytania dotyczące naszych produktów, chcielibyśmy usłyszeć od Ciebie. Skontaktuj się z nami, aby rozpocząć rozmowę na temat twoich wymagań, a my współpracujemy z Tobą, aby znaleźć najlepsze rozwiązanie dla twoich potrzeb obrazowania fluorescencyjnego.
Odniesienia
- Murphy, DB (2001). Podstawy mikroskopii świetlnej i obrazowania elektronicznego. Wiley - Liss.
- Pawley, JB (red.). (2006). Podręcznik biologicznej mikroskopii konfokalnej. Springer Science & Business Media.
