Przesuń instrukcje montażu
Przed rozpoczęciem procesu przygotowywania slajdu upewnij się, że zebrałeś wszystkie niezbędne materiały, w tym szkiełka, szkiełka, kropelki lub piper oraz wszelkie chemikalia lub plamy, które zamierzasz wykorzystać.
Istnieją dwa podstawowe rodzaje slajdów, z którymi będziesz pracować:
1. Standardowy płaski szklany zjeżdżalnia.
2. Depresja lub odwiert, która ma małą studnię lub wgłębienie w jej środku, zaprojektowane w celu trzymania kropli wody lub płynnej substancji. Są one zazwyczaj droższe i są powszechnie używane bez poślizgu osłony.
Standardowe szkiełka mogą być wykonane z plastiku lub szkła, mierząc rozmiar 1 x 3 cale (25 x 75 mm) i grubości od 1 do 1,2 mm.
W przypadku slajdów mokre niezbędne jest poślizg lub okładka. Jest to ultra-cienki, kwadratowy kawałek szkła (lub plastiku), który jest starannie ustawiony na spadku próbki. Bez pokrywy napięcie powierzchniowe spowodowałoby, że kropla tworzy kształt kopuły. Karta przeciwdziała to napięciu, zapewniając, że próbka leży płasko do precyzyjnego badania przy minimalnym skupieniu. Ponadto pokrycie działa jako zabezpieczenie, zapobiegając zakłóceniu obiektywu obiektywu.
Mocki zjeżdżalni mikroskopu
Mocki mikroskopowe odnoszą się do metod stosowanych do zabezpieczenia szkiełek mikroskopowych lub próbek do obserwacji. Istnieją przede wszystkim cztery typy:
1. Slajd Mocts:Są to najczęstszy typ i obejmują umieszczenie próbki na płaskim szklanym szkiełku, często przy użyciu podłoża montażowego (jak ciecz lub żel), aby utrzymać go na miejscu. Następnie dodaje się poślizg pokrywowy w celu ochrony próbki i zapewnia płaską powierzchnię do oglądania.
2. Wnęka lub studzienki:Slajdy te mają małą studnię lub depresję w środku, zaprojektowana do trzymania kropli płynu, takiej jak woda lub wyspecjalizowany płyn montażowy. Są używane podczas pracy z okazami wymagającymi zanurzenia w cieczy.
3. Tymczasowe wierzchowce:Mocki te nie są przeznaczone do długoterminowego przechowywania lub obserwacji. Obejmują proste i szybkie metody, takie jak umieszczenie okazu na zjeżdżalni z kroplą wody. Często są używane do obserwacji żywych organizmów lub wrażliwych na czas próbek.
4. Stałe wierzchowce:Są one zaprojektowane do długoterminowego przechowywania i obserwacji. Obejmują one bardziej złożone procedury, w tym stosowanie specjalistycznych mediów montażowych, które stwardniają z czasem, kapsułkowając próbkę w przezroczystym medium. Ten rodzaj wierzchowca jest często wykorzystywany do slajdów edukacyjnych i badań naukowych.
Każdy rodzaj wierzchowca ma swoje specyficzne zastosowania i jest wybierany na podstawie charakteru próbki i celu obserwacji.
Cztery wspólne sposoby zamontowania zjeżdżalni mikroskopu
Istnieje kilka powszechnych metod montażu szkiełka mikroskopowego, w zależności od rodzaju próbki i celu obserwacji. Oto cztery powszechne sposoby zamontowania zjeżdżalni mikroskopu:
Suche montaż:
Procedura: W tej metodzie próbka jest umieszczana bezpośrednio na czystym, suchym szkiełku mikroskopowym. Jest często stosowany w przypadku próbek, które nie wymagają dodatkowej wilgoci lub zanurzenia w cieczy.
Zastosowania: Suche montaż nadaje się do obserwacji stałych próbek, takich jak części roślin, włosy lub minerały.
Mokre montaż:
Procedura: Niewielki kroplę cieczy (zwykle woda lub wyspecjalizowany płyn montacyjny) jest umieszczany na szkiełku, a następnie do tej kropli dodaje się próbkę. Poślizg pokrycia jest delikatnie umieszczany na próbce, aby zapobiec wysuszeniu i zniekształceniu.
Zastosowania: Mokre mocowania są używane do obserwacji żywych organizmów, komórek lub próbek wymagających zanurzenia w cieczy.
Montaż squasha:
Procedura: Ta technika polega na umieszczeniu próbki na zjeżdżalni, a następnie delikatne naciskanie go za pomocą poślizgu pokrywy lub kolejnym szkiełka, aby ją spłaszczyć. Jest to powszechnie stosowane do tkanek miękkich lub delikatnych części roślin do utworzenia cienkiej, przezroczystej warstwy do obserwacji.
Zastosowania: Mocki do squasha są używane do badania tkanek, szczególnie w biologii roślin.
Montaż rozmazy:
Procedura: Niewielka ilość próbki (zwykle płyn lub substancja pół cieczy) rozprzestrzenia się cienko i równomiernie na szkiełku, często przy użyciu krawędzi kolejnego slajdu. Wówczas można go wysuszyć lub może zostać ustalony za pomocą środka chemicznego.
Zastosowania: Mocki rozmazowe są powszechnie stosowane do obserwacji mikroorganizmów, takich jak bakterie lub do przygotowywania rozmazów krwi do mikroskopii.
Metody te zaspokajają różne rodzaje próbek i ich specyficzne wymagania dotyczące obserwacji. Wybór techniki montażowej zależy od takich czynników, jak charakter okazu, cel obserwacji oraz pożądany poziom szczegółowości i jasności.
Plamy mikroskopowe
Plamy mikroskopowe, znane również jako plamy biologiczne lub barwniki, są substancjami stosowanymi w mikroskopii w celu zwiększenia kontrastu i widoczności próbek biologicznych. Działają one przez selektywne wiązanie ze specyficznymi składnikami komórkowymi, takimi jak białka, kwasy nukleinowe lub lipidy, co pozwala na łatwiejszą wizualizację i różnicowanie struktur komórkowych. Oto niektóre popularne rodzaje plam mikroskopowych:
1. Hematoksylina i eozyna (H&E):
Typ: Plażeniowa plama.
Zastosowanie: Jeden z najczęściej stosowanych plam w histologii, hematoksylinowe plamki komórkowe jądro niebieskie, podczas gdy eozyna plami cytoplazma i niektóre struktury zewnątrzkomórkowe różowe.
2. Blue metylenowy:
Typ: podstawowy barwnik.
Zastosowanie: Plamy jądro komórkowe Niebieskie. Jest powszechnie stosowany do ogólnej cytologii i badań mikrobiologii.
3. Giemsa:
Typ: Plażeniowa plama.
Zastosowanie: Używany do barwienia komórek krwi, różnicuje składniki jądrowe i cytoplazmatyczne w różnych kolorach, umożliwiając identyfikację różnych typów komórek.
4. Gram plama:
Typ: Plażeniowa plama.
Zastosowanie: Rozróżnia dwie główne kategorie bakterii: Gram-dodatnie (które zachowują barwnik fioletu krystalicznego) i Gram-ujemne (które zajmują kontrstain safraniny).
5. Plama Wrighta:
Typ: Plażeniowa plama.
Zastosowanie: Stosowana głównie do rozmazów krwi, ta plama pozwala na różnicowanie rodzajów krwinek i identyfikację nieprawidłowości.
6. Jod Lugola:
Typ: plama na bazie jodu.
Użycie: Zastosowane w połączeniu z jodem Grama można go wykorzystać do zwiększenia kontrastu niektórych struktur komórkowych.
7. Olej czerwony o:
Typ: barwnik lipofilowy.
Zastosowanie: wiąże się szczególnie z lipidami, co czyni go przydatnym dla barwienia struktur, takich jak kropelki tłuszczu w komórkach.
8. Kwas okresowy (PAS):
Typ: plama chemiczna.
Zastosowanie: reaguje z węglowodanami, podkreślając struktury takie jak glikogen, mucyny i inne glikoproteiny.
9. Toluiidine Blue:
Typ: podstawowy barwnik.
Zastosowanie: Plamy kwaśne składniki w komórkach i tkankach, w tym granulki komórek tucznych i kwasy nukleinowe.
10. Safranin:
Typ: podstawowy barwnik.
Zastosowanie: Stosowany jako zaraza w barwieniu gram do kolorowania bakterii Gram-ujemnych.
To tylko kilka przykładów i istnieje wiele innych wyspecjalizowanych plam stosowanych do określonych celów mikroskopii, takich jak specjalne plamy dla tkanek łącznych, włókien nerwowych lub określonych struktur komórkowych. Wybór plamy zależy od rodzaju próbki i informacji potrzebnych z badania mikroskopowego.
Kroki barwienia mikroskopu
1. Zacznij od przygotowania slajdu mokrego, umieszczania próbki na czystym szkiełku mikroskopowym.
2. Za pomocą kroplowania lub pipety ostrożnie zbierz kroplę wybranej plamy.
3. Umieść tę kroplę plamy na zewnętrznej krawędzi poślizgu pokrywy, zapewniając, że kontaktuje się z krawędzią zjeżdżalni.
4. Aby ułatwić równy rozkład plamy, ustaw kawałek serwetek lub ręcznika papierowego wzdłuż przeciwnej strony poślizgu pokrywy, mocno naciskając go na krawędź.
5. W razie potrzeby zastosuj dodatkowy spadek plamy, aby zagwarantować całkowite pokrycie okazu.
6. Slajd jest teraz w pełni przygotowany do obserwacji pod mikroskopem.
